一、厭氧菌的培養(yǎng)方式 厭氧菌的培養(yǎng)過程中,最重要的就是為其提供厭氧生長環(huán)境,厭氧環(huán)境的提供可以從以下兩方面著手。
一方面可以提供厭氧裝置如厭氧手套箱,厭氧產(chǎn)氣罐或者厭氧產(chǎn)氣袋。另一方面可以提供含有還原劑的特殊培養(yǎng)基,如含少量瓊脂,L-半胱氨酸,硫乙醇酸鈉,巰基乙醇等的液體培養(yǎng)基。
要注意的是,如果沒有厭氧手套箱,我們在對厭氧菌活化或者是轉(zhuǎn)接操作的時候,動作要快,防止厭氧菌在空氣中暴露的時間過長。
二、我們正常的大氣環(huán)境中是有氧環(huán)境,這類厭氧菌通常生活在哪里呢?我們研究這類菌有什么意義呢? 我們的大氣環(huán)境確實是一個有氧環(huán)境。但是,地球上還存在很多厭氧環(huán)境比如深海和淤泥中,厭氧菌在我們?nèi)梭w中也普遍存在。
我們研究厭氧菌,一方面是因為厭氧菌是上一類重要的病原菌;另一方面,哺乳動物腸道菌群中99%是厭氧菌,其中許多是促進消化吸收的有益菌,不管是從致病機理,還是開展疾病來說對厭氧菌的研究意義都很重大。
三、為什么好氧菌在生長繁殖過程中必須有氧氣存在,而厭氧菌在生長過程中氧氣卻對對其產(chǎn)生毒害作用呢? 微生物雖然可以利用氧,通過有氧呼吸來產(chǎn)生更多的能量,滿足機體的需要,但是氧對一切生物都會產(chǎn)生有毒害的代謝產(chǎn)物,比如會產(chǎn)生超氧陰離子,過氧化氫和羥自由基。超氧陰離子和羥自由基是強氧化劑,能氧化細胞內(nèi)的大分子物質(zhì)和有機化合物,對細胞造成損傷,過氧化氫也會損害一些細胞組分。
但是,微生物細胞可以通過產(chǎn)生過氧化氫酶,超氧化物歧化酶和超氧化物還原酶等等這些酶類來清除細胞內(nèi)的毒性氧。 對于好氧菌來說,細胞內(nèi)往往會產(chǎn)生超氧化物歧化酶和過氧化氫酶,所以氧氣對這類微生物不會產(chǎn)生毒害。
那么對于厭氧菌來說,細胞內(nèi)無法合成超氧化物歧化酶(SOD)和細胞色素氧化酶,大多數(shù)還缺乏過氧化氫酶。所以,這類微生物無法消除氧氣對它的毒害作用。只能在無氧的環(huán)境中通過發(fā)酵或無氧呼吸產(chǎn)能。